Материалы медицинских конференций

Главная / Материалы медицинских конференций / 2003 / Материалы Международных чтений, посвященных 100-летию со дня рождения члена-коррес-пондента АН СССР, академика АН АрмССР Э.А.Асратяна.

Использование метода угасания условных рефлексов для тестирования свойств коменовой кислоты

Лечение различных видов опиатных наркотических зависимостей – чрезвычайно актуальная проблема современности. Сегодня наиболее распространённым способом лечения является замена «тяжёлых» наркотиков более «лёгкими». Но у этого способа есть существенный недостаток. К «лёгким» наркотикам также возникает привыкание, а впоследствии и зависимость. Мы предложили заменить «тяжёлые» наркотики коменовой кислотой – одним из компонентов опийного мака. Для того, чтобы на животных проверить, вызывает ли коменовая кислота привыкание и зависимость, мы предлагаем использовать метод безусловного угасания условных рефлексов.

Эксперимент проводился на 96 белых беспородных половозрелых крысах массой 190–210 г в течение 50 суток в 3 этапа. 32 животных вошли в экспериментальную группу, 32 – в первую контрольную, 32 – во вторую экспериментальную. Животные содержались в клетках группами по 4 особи при свободном доступе к воде и пище и постоянном свето-темновом режиме 12:12 ч. Работа с животными производилась в соответствии с «Принципами ухода за лабораторными животными».

1-й этап – 1-18 сутки – у крыс экспериментальной и первой контрольной групп вызывалась наркотическая зависимость путём внутрибрюшинного введения один раз в сутки 1% гидрохлорида морфина в нарастающих дозах от 10 до 50 мг/кг. Факт возникновения морфийной зависимости устанавливали по возникновению симптомов абстинентного синдрома через 24 часа после последней инъекции. Животным 2-й контрольной группы  вводили 0,9% NaCl.

2-й этап – 19-36 сутки – вместо морфина крысам экспериментальной группы вводили коменовую кислоту (50 мг/кг) внутрибрюшинно один раз в день. Животным  первой контрольной  группы – эквивалентные объёмы 0,9% NaCl, второй контрольной группы – коменовую кислоту (50 мг/кг).

3-й этап – отмена инъекций коменовой кислоты.

Все инъекции осуществляли в специальной камере, состоящей из двух отсеков: большого ярко освещённого и маленького тёмного. Отсеки соединены между собою проходом с дверцами. Крыс высаживали в светлый отсек и наблюдали за реакцией животных.

В течение 2-х дней до начала эксперимента крыс высаживали в светлый отсек камеры. Абсолютно все животные вели себя одинаково. В первую же высадку они обследовали светлый отсек, очень быстро обнаруживали открытый проход в тёмный отсек и сразу же скрывались в нём. Последующие посадки в светлый отсек сразу же заканчивались побежкой в тёмный отсек. Предпочтение тёмного маленького отсека – естественная реакция для крыс.

На третий день животных высаживали в светлый отсек, предварительно закрыв переход в тёмный. Не вынимая крысу из камеры, только чуть приподнимая от пола, прихватив пальцами за спинку, инсулиновым шприцом с очень тонкой иглой делали инъекции. После инъекции морфина крысы впадали в состояние каталепсии на 3-8 мин. В дальнейшем процедура инъекции всегда проходила в светлом отсеке камеры. Признаки развития морфийной зависимости (развитие абстинентного синдрома) появлялись к 6-10 суткам. Первые 7-12 дней крыс насильно удерживали в светлом отсеке тем, что держали закрытой дверцу в тёмный отсек до тех пор, пока не сделают инъекцию морфина. После инъекции дверцу открывали, и через некоторое время (почти сразу) крысы уходили в тёмный отсек. Но уже к 8-15 дню у всех 32 крыс первой контрольной группы и 30 крыс экспериментальной выработался положительный условный рефлекс на введение морфина в светлом отсеке, подкрепляющийся получением приятной эмоции и устранением неприятных симптомов абстиненции. Рефлекс проявлялся  в том, что при посадке в светлый отсек камеры крысы не уходили из него, несмотря на открытую дверцу в тёмный отсек, до тех пор, пока не получали инъекцию морфина, после чего побежка в тёмный отсек всё-таки совершалась, сразу или через некоторое время. У двух крыс экспериментальной группы описанный условный рефлекс выработать не удалось. Ни у одной из 32 крыс второй контрольной группы, получавших 0,9% NaCl, рефлекс также не выработался.

На 2-м этапе у экспериментальных животных, коменовая кислота, вводимая вместо морфина, купировала абстиненцию, но не вызывала каталепсию. При этом уже на 4-10 сутки введения коменовой кислоты 27 (из 30) крыс экспериментальной группы перестали дожидаться очередной инъекции в светлом отсеке, но сразу после посадки убегали в тёмный отсек. Но у 3 оставшихся животных положительный условный рефлекс на введение теперь уже не морфина, а  коменовой кислоты в светлом отсеке,  не угас, и крысы по-прежнему дожидались этой процедуры в светлом отсеке.

В это же время (с 19 по 50 сутки общего времени эксперимента) с крысами первой контрольной группы произошли следующие изменения. В условиях отмены морфина и развившегося абстинентного синдрома 4 крысы умерли в сроки от 2 до 6 дня отмены. Угасание положительного рефлекса на добровольное пребывание в светлом отсеке камеры у оставшихся 28 крыс в условиях отмены морфина произошло в сроки от 7 до 14 суток.

Ни у одного из животных второй контрольной группы, получавших с 19 по 36 сутки эксперимента коменовую кислоту, условный рефлекс добровольного пребывания в светлом отсеке камеры не выработался.

На 3-ем этапе, в условиях отмены инъекций коменовой кислоты мы не наблюдали изменения в поведении животных.

Полученные данные позволяют сделать вывод о том, что субстанция Q-134 не вызывает привыкания и, тем более, зависимости. В пользу этого вывода говорят несколько фактов. Первый из них – условный рефлекс добровольного пребывания в светлом отсеке до получения инъекции не удалось выработать ни у одного (!) из 32 животных второй контрольной группы, получавшего коменовую кислоту. Очевидно, что коменовая кислота не вызывает развития положительных эмоциональных состояний. Второй – рефлекс на добровольное пребывание в светлом отсеке камеры быстрее и легче тормозился именно у крыс, получавших коменовую кислоту на стадии отмены морфина, чем у животных, не получавших это вещество (4-10 и 7-14 сутки угасания рефлекса соответственно).