Материалы медицинских конференций

Главная / Материалы медицинских конференций / 2003 / Материалы Международных чтений, посвященных 100-летию со дня рождения члена-коррес-пондента АН СССР, академика АН АрмССР Э.А.Асратяна.

Роль рецепторов внутриклеточных Ca2+-депо в регуляции na,k-насосом холиночувствительности нейронов виноградной улитки при привыкании

Na,K-насос регулирует снижение холиночувствительности нейронов виноградной улитки на клеточном аналоге привыкания с участием внутриклеточного кальция, в изменении уровня которого вовлечены Na/Ca-обмен и системы мобилизации Са2+ из внутриклеточных Са2+-депо [Пивоваров с соавт., 2001]. В настоящей работе исследована роль двух типов рецепторов Са2+-депо (инозитолтрифосфата (IP3) и рианодиновых) в действии ингибитора Na,K-насоса уабаина на холиночувствительность нейронов виноградной улитки при привыкании. В поведенческой части работы исследовали действие уабаина на привыкание улитки к ритмической тактильной стимуляции. Интегральную оборонительную реакцию улитки регистрировали бесконтактно с помощью оригинального устройства [Москвитин, Пивоваров, 2003]. Серия выработки привыкания улитки к тактильной стимуляции включала 10 повторных тактильных раздражений постоянной силы, которые наносили на одну и ту же область головы (между глазными щупальцами) с постоянным межстимульным интервалом 20-30 с. В электрофизиологической части работы для регистрации трансмембранных токов нейронов ЛПа2, ЛПа3, ППа3 и ППа2 на препарате изолированных ганглиев использовали методику двухэлектродной фиксации потенциала на мембране. Применяли локальную ионофоретическую аппликацию ацетилхолина (АХ) на сому нейрона. Снижение холиночувствительности нейронов оценивали по глубине депрессии амплитуды входящего тока, вызванного АХ (АХ-тока) во время ритмических локальных подведений АХ к соме нейронов (межстимульный интервал составлял 1.5-4.5 минуты). Инъекция уабаина (100 мкМ) в висцеральный мешок виноградной улитки приводила к достоверному возрастанию выборочной дисперсии, которая характеризует разброс глубины подавления оборонительной реакции улитки. При этом уабаин не изменял средние значения сравниваемых выборок. Влияние ингибитора Na,K-насоса уабаина на привыкание виноградной улитки к тактильной стимуляции оказалось идентичным модификации уабаином снижения холиночувствительности командных нейронов оборонительного поведения виноградной улитки на клеточном аналоге привыкания.

Для исследования роли внутриклеточных рецепторов кальциевых депо во влиянии уабаина на холиночувствительность командных нейронов оборонительного поведения виноградной улитки при привыкании изучали влияние лигандов двух типов рецепторов Са2+-депо – инозитол-1,4,5-трифосфата (IP3) и рианодиновых. Антагонист IP3 рецепторов гепарин (0.1 мM), агонист этих рецепторов IP3 (0.1 мM) и ингибитор высвобождения Cа2+, вызываемого Cа2+, антагонист рианодиновых рецепторов дантролен (0.1 мM) препятствовали изменению уабаином депрессии АХ-тока; а агонист/антагонист рианодиновых рецепторов рианодин при двух разных концентрациях (0.1 мM и 1 мM) не влиял на эффект уабаина. Совпадение эффектов уабаина на поведенческое привыкание и на его клеточный аналог, а также факт участия исследуемых нейронов в реализации оборонительного поведения животного [Максимова, Балабан, 1983] позволяют перенести обнаруженный внутриклеточный механизм с аналога привыкания на соответствующее поведение животного. 

Сделан вывод об участии  Са2+, мобилизованного из внутриклеточных Са2+-депо через рецепторы IP3 в нейронном механизме регуляции Na,K-насосом привыкания виноградной улитки к тактильной стимуляции.